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一、樣品信息樣品的溶血、脂血、黃疸等會對測定結果產生非化學反應的干擾。因此,應根據溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性,采用雙波長或多波長的檢測模式,并在結果計算中扣除因溶血、脂血、黃疸引起的影響,減少干擾程度。二、測定范圍每種待測物都有一個可測定的濃度或活性范圍,樣品結果若超過此范圍,分析儀將顯示結果超過范圍的提示。表示試劑已經變質,應更換合格試劑。三、底物耗盡使用連續監測法、兩點法測定酶活性時,若酶活性非常高,底物接近被耗盡,吸光度上升或下降會超過某一吸光度變化范圍,監測期的吸...
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有些液體雙試劑,其實質并不真正具備抗干擾的能力而只是解決了試劑的液體化和穩定性問題。下面具體講解幾個例子:1、如ALT試劑盒中,NADH在pH7.5~7.8水溶液中極不穩定,在pH8.7時才能穩定保存。因此,為了保證試劑穩定性,液體雙試劑的R1需要維持pH8.7,但此時LDH活性大大下降,就失去消除內源性丙酮酸的功能,只有加入試劑R2后,反應混合液的pH下降至LDHzui適pH,在經過延遲時間60S后,才能消除內源性丙酮酸的干擾。2、再如Tfinder反應中抗Vc干擾問題:由...
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1、三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH8.0)取三羥甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,攪拌溶解,并稀釋至1000ml,用6mol/L鹽酸溶液調節pH值至8.0,即得。2、三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH8.1)取氯化鈣0.294g,加0.2mol/L三羥甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L鹽酸溶液調節pH值至8.1,加水稀釋至100ml,即得。3、三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH9.0)取三羥甲基氨基甲烷6.06g,加鹽酸賴氨酸3.65g、氯化鈉5.8g、乙二胺四醋酸二鈉...
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1、直接2、間接法3、未標記抗體法抗體和酶、熒光素結合后,或多或少的降低了抗體與抗原的結合能力。有酶橋法和PAP法,但前者弊端較多。PAP法(PeroxidaseAntiperoxidase.PAP)PAP復合物(二分子抗體,三分子酶),體積小,穩定,穿透性好特點:較間接法敏感20~100倍,較前幾種方法非特異性染色輕。4、ABC法(Avidin-Biotin-ComplexMethod)Avidin——卵白素,有四個亞單位,每個亞單位有138個氨基酸,分子兩68kD。一個卵...
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一、阻止血液過快凝固血液暴露在空氣中會凝固,當將血液滴入試紙采集區時,由于毛細效應,血液會向試紙的檢測區擴散,但這需要一點時間,如果血液凝固過快,可能造成血液未擴散到檢測區,就已經凝固,導致檢測失敗。另一方面,血漿中微凝血塊過多,會減慢擴散的速度,檢測結果產生的時間就會延長。二、稀釋血液濃度加入稀釋液后,血液的濃度會降低,HIV抗體的濃度也隨之降低,這就為試紙的靈敏度提出了更高的要求,需要試紙能夠檢測出低濃度的HIV抗體,也正因此,當檢測結果為陽性時,那么結果是非常準確的。但...
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當PCR結果不甚滿意時,首先檢查以下幾方面并遵照執行:1、將PCR反應的試管與反應板緊貼。2、當酶反應混合物以70℃"熱啟動"開始循環時,切記在加入酶后稍微振蕩一下,因為在0.2-ml的PCR管中不能均勻傳熱。3、不要隨意減少dNTP的用量,它是一個系統的因素,必須與其它成份保持平衡。4、對于有問題的PCR反應,例如模板的量少,模板不純和環狀模板等,先嘗試加Taq酶前的體系進行預變性,后加模板進行正常PCR擴增。5、沒有擴增產物:在提供MgCl2緩沖液中,以0.25mmol/...
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一、分析試驗的應用類型一般抗體說明書都列出該抗體經試驗驗證過適用于何種分析類型,如:可以應用于WBIHCICCELASA分析等,如果抗體說明書沒有提及的應用類型,并不意味著該抗體不適用于此種分析應用類型,而僅是說明尚未經過此種分析試驗驗證,如果抗體不適用某些分析試驗,則會在抗體說明書上標注出來不適于某分析試驗。二、樣本蛋白的結構性質了解樣本蛋白的結構性質有助于選擇zui合適的抗體,至少兩方面因素需要考慮:1、待測樣本蛋白的結構域:抗體是由各種不同免疫原免疫宿主而制備得來,抗體...
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