1、直接
2、間接法
3、未標記抗體法
抗體和酶、熒光素結合后,或多或少的降低了抗體與抗原的結合能力。有酶橋法和PAP法,但前者弊端較多。PAP法(PeroxidaseAntiperoxidase.PAP)PAP復合物(二分子抗體,三分子酶),體積小,穩定,穿透性好特點:較間接法敏感20~100倍,較前幾種方法非特異性染色輕。
4、ABC法(Avidin-Biotin-ComplexMethod)
Avidin——卵白素,有四個亞單位,每個亞單位有138個氨基酸,分子兩68kD。一個卵白素分子能與4個分子的生物素結合,基本上不可逆,比抗原抗體結合力大1000000倍,只有在pH1.5的條件下才能將其分離。Biotin——生物素,一分子的抗體可結合150個生物素分子,和多種酶結合后,不影響催化活性。
5、LAB法(LabeledAvidin-Biotin)
特點:1、敏感性較PAP法提高20~40倍;2、非特異性染色幾乎沒有;3、可用于IHC,核酸雜交等。
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